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霍亂雙糖鐵瓊脂(KIA)

  • 貨號:CM416
  • 規(guī)格:

    250g

  • 產(chǎn)品說明:用于霍亂弧菌發(fā)酵葡萄糖、乳糖及產(chǎn)硫化氫的復(fù)合生化試驗 ( 含 2%NaCl)(SN 標(biāo)準(zhǔn) )
  • 用途:

    用于霍亂弧菌的生化鑒定。(SN標(biāo)準(zhǔn))

    配方:(g/L)

    牛肉粉3.0
    ?蛋白胨15.0?
    乳糖5.0?
    硫酸亞鐵0.2?
    硫代硫酸鈉0.30?
    酚紅0.024?
    酵母粉3.0?
    蛋白胨5.0?
    葡萄糖1.0?
    氯化鈉20.0?
    瓊脂12.0?

    附加試劑:

    ????

    原理:

    牛肉粉、酵母粉、?蛋白胨、蛋白胨在培養(yǎng)基中作為基礎(chǔ)營養(yǎng)物質(zhì)提供菌體細(xì)胞生長所需的氮源、碳源、維生素等;雙糖(乳糖、葡萄糖)為可發(fā)酵的碳源,細(xì)菌代謝其產(chǎn)酸產(chǎn)氣等;硫酸亞鐵及硫代硫酸鈉分別作為產(chǎn)硫化氫的指示劑和底物;高含量氯化鈉可滿足弧菌生長嗜鹽的要求同時可以抑制不耐鹽的細(xì)菌生長;酚紅作為酸堿指示劑;瓊脂作為凝固劑。

    在該培養(yǎng)基上可以觀察到三種基本的發(fā)酵類型:①僅發(fā)酵葡萄糖:斜面呈紅色(堿)/底層呈黃色(酸)。斜面呈紅色,說明葡萄糖被利用,培養(yǎng)18h-24h后,低濃度(0.1%)的葡萄糖完全被利用了,細(xì)菌開始利用培養(yǎng)基中的蛋白胨作為生長的養(yǎng)料。蛋白胨分解釋放氨,同時葡萄糖分解產(chǎn)生的酸部分揮發(fā),最終在培養(yǎng)基斜面中顯出堿性pH反應(yīng)(紅色),然而在培養(yǎng)基底部,由于氧張力較低,分解葡萄糖產(chǎn)生的酸未揮發(fā)仍在底部保持酸性反應(yīng)(底部呈黃色);②同時發(fā)酵葡萄糖和乳糖:斜面呈黃色(酸)/底層呈黃色(酸):葡萄糖和乳糖均被利用,由于乳糖的量較大,18h-24h內(nèi),仍有部分乳糖未分解完,斜面仍然呈酸性反應(yīng)(黃色);③均不發(fā)酵葡萄糖和乳糖:由于僅利用蛋白胨產(chǎn)堿使斜面和底部均呈紅色。

    該培養(yǎng)基另一個鑒別系統(tǒng)是細(xì)菌產(chǎn)硫化氫指示劑,第一步細(xì)菌在酸性環(huán)境下利用培養(yǎng)基中的無機(jī)鹽硫代硫酸鈉產(chǎn)生硫化氫氣體,該氣體是一種無色氣體,它與培養(yǎng)基中另外一種無機(jī)鹽硫酸亞鐵種的亞鐵離子反應(yīng)生成黑色不容性物質(zhì)硫化亞鐵。因此細(xì)菌產(chǎn)硫化氫可由培養(yǎng)基變黑判斷。此外,由于黑色硫化亞鐵沉淀可以掩蓋在底部產(chǎn)生的酸性反應(yīng),但由于硫化氫生成需要在酸性環(huán)境下進(jìn)行,因此產(chǎn)生了硫化氫,即使酸性反應(yīng)未被觀察到,也是存在的。

    法:

    稱取64.5g于1L蒸餾水中,加熱煮沸至完全溶解,分裝,121℃高壓滅菌15min,制成高層斜面?zhèn)溆谩?/span>

    注意事項:

    ????

    培養(yǎng)基質(zhì)控?

    霍亂雙糖鐵瓊脂(KIA)

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